葡聚糖凝胶 LH-20

更新:2014-12-30 20:27:06

中文名:葡聚糖凝胶 LH-20说明书下载暂无
英文名:Sephadex LH20
描述:Sephadex LH20是一种价钱较高的填料,特点: 1、适合用有机溶剂分离嗜脂性分子,可以非常经济地大规模制备各种天然产物 2、结合凝胶过滤、分配色谱及吸附性层析于一身,分离结构非常相近的分子 3、载量可高达300mg样品/ml凝胶,极少需要再生,分离效果可保持十几年不变。
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    GE011001M100g1680GBCBIO
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产品介绍

    Sephadex LH20简介
    全称为:羟丙基葡聚糖凝胶。常用商品凝胶的一种(另一种为交联葡聚糖凝胶Sephadex G)。Sephadex LH-20为Sephadex G-25(葡聚糖凝胶按交联度分类的其中一种商品型号)经羟丙基化处理后得到的产物,此时,葡聚糖凝胶分子中的葡萄糖部分将与羟丙基结合成下列醚键形式: -OH → -OCH2CH2CH2OH
    与Sephadex G比较,Sephadex LH-20分子中 -OH 基总数虽无改变,但碳原子数所占比例却相对增加了,所以Sephadex LH-20不仅可在水中应用,也可在极性有机溶剂或他们与水组成的混合溶剂中膨润使用。

    Sephadex LH20是一种价钱较高的填料,特点: 1、适合用有机溶剂分离嗜脂性分子,可以非常经济地大规模制备各种天然产物 2、结合凝胶过滤、分配色谱及吸附性层析于一身,分离结构非常相近的分子 3、载量可高达300mg样品/ml凝胶,极少需要再生,分离效果可保持十几年不变。
    ephadex LH20 的原理
    Sephadex LH20的分离原理是根据分子大小,主要有两方面:以凝胶过滤作用为主,兼具反相分配的作用(在反相溶剂中)。因为凝胶过滤作用,所以大分子的化合物保留弱,先被洗脱下来,小分子的化合物保留强,最后出柱(具体原理可参见分子筛层析)。如果使用反相溶剂洗脱, Sephadex LH20对化合物还起反相分配的作用,所以极性大的化合物保留弱,先被洗脱下来,极性小的化合物保留强,后出柱。如果使用正相溶剂洗脱,这主要靠凝胶过滤作用来分离。

    Sephadex LH20 洗脱溶剂
    Sephadex LH20 洗脱溶剂因分为两类:反相和正相两种。用得最多的是反相溶剂洗脱,以甲醇/水系统最为常见,先用水,逐渐增加甲醇比例,最后用100%甲醇冲柱。正相系统以氯仿/甲醇最为常见,先用50%氯仿/甲醇,逐渐增加甲醇比例,最后用100%甲醇冲柱。
    样品的处理和洗脱溶剂的选择
    如果样品极性大,就选用反相溶剂洗脱(甲醇/水),样品用最少体积的甲醇/水(尽可能甲醇少一些)溶解,过滤后,湿法上样(一定要滤喔!要是把Sephadex LH20 堵啦,就得将Sephadex LH20 的柱头部分弃去,很心痛呀)。如果样品极性小,这选用正相溶剂洗脱(氯仿/甲醇),样品用最少体积的氯仿/甲醇溶解,过滤后,湿法上样。
    分离的技巧
    (1) 分离时流速不可太快,切切不可心急,所谓欲速则不达;接馏分时可开全速,节省时间。
    (2)柱子尽可能长, Sephadex LH20 柱长的增加将极大地改善分离,所不要吝惜填料,宁可将填料全装在一根大柱子中,不要将填料装成几根小柱。所谓集中优势兵力,打击敌人。
    (3) 馏分一定要接的细,可1/10,或1/20 个保留体积接成一馏分。
    (4) 洗脱体积一般为2-3个保留体积,对特殊保留强的化合物,可洗脱5个保留体积。
    (5)鞣质成分死吸附严重,如不在乎填料者,可用Sephadex LH20 分鞣质
    (6)Sephadex LH20 对黄酮类成分的分离效果极佳,方法很成型,有大量文献参考。
    (7)填料反复使用,每次用完,一般可用甲醇将柱子洗干净,然后用下一次分离的起步溶剂将甲醇替换出来,待用。暂时不用试可以水洗→含水醇洗(醇的浓度逐步递增)→醇洗,最后泡在醇中贮于磨口瓶中备用。如长期不用时,可在以上处理基础上,减压抽干,再用少量乙醚洗净抽干,室温充分挥散至无醚味后,60~80°C干燥后保存。

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