核酸酶抑制剂复合物/异硫氰酸胍替代物

更新:2022-4-20 16:53:07

    中文名:核酸酶抑制剂复合物/异硫氰酸胍替代物
    英文名:Nuclease inhibitor complex
    别名:
    CAS No.:级别:试剂级
    分子式:分子量:
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    货号规格价格品牌
    N8406-500g500g140GBCBIO
    N8406-5kg5kg1100GBCBIO
    N8406-25kg25kg询价GBCBIO
产品介绍

    一。介绍:

    本核酸酶抑制剂复合物为多成分的复合制剂,与表面活性剂的协同作用下,能够快速渗透到细胞内,比传统方法更能快速地帮助抑制剂与细胞内的核酸酶结合,从而实现快速稳定核酸,防止降解。本核酸酶抑制剂复合物为专利产品,已为好几大病毒保存液厂家所采用,能够提供产品的竞争力,也能有效降低目前市场上异硫氰酸紧缺的影响。

    二,实验测试:

    通过对比含150g/L本核酸酶抑制剂复合物的保存液,与传统3M异硫氰酸胍配方的保存液保存假病毒核酸稳定性,来评价本核酸酶抑制剂复合物的有效性。

    1. 制备保存液

    无标题文档

    1 经典款

    2

    3

    4

    5

    3M 异硫氰酸胍
        柠檬酸钠
        表面活性剂
        EDTA

    0.1M异硫氰酸胍
        柠檬酸钠
        表面活性剂
        EDTA
    150g/L 核酸酶抑制剂复合物

    0.5M异硫氰酸胍
         柠檬酸钠
         表面活性剂
         EDTA
    150g/L 核酸酶抑制剂复合物

    1M异硫氰酸胍
         柠檬酸钠
         表面活性剂
          EDTA
    150g/L 核酸酶抑制剂复合物

    2M异硫氰酸胍
         柠檬酸钠
         表面活性剂
         EDTA
    150g/L 核酸酶抑制剂复合物

    6

    7’

    8

    9

    10

    11

    3M 异硫氰酸胍
         柠檬酸钠
         表面活性剂
         EDTA
    150g/L 核酸酶抑制剂复合物

    0.1M异硫氰酸胍
           柠檬酸钠
           表面活性剂
            EDTA

    0.5M异硫氰酸胍
           柠檬酸钠
           表面活性剂
            EDTA

    1M异硫氰酸胍
           柠檬酸钠
           表面活性剂
            EDTA

    2M异硫氰酸胍
           柠檬酸钠
           表面活性剂
            EDTA

    PBS

    2.实验流程

    假病毒核酸制备:用咽拭子在正常人口腔采样后,用4ml生理盐水浸泡拭子,剧烈涡旋1min后丢弃拭子,加入100ul新冠假病毒(滴度108)涡旋混匀。取200ul含假病毒的拭子浸泡液加入到1ml上述配制的保存液(第一组及第二组)离心管中,混匀后于室温保存。于24h、72h、120h后分别取200ul保存液用GBCBIO公司的Virus DNA/RNA Kit进行核酸提取,最后用100ul RNase-free Water洗脱。核酸提取完后采用疾控中心推荐的引物即进行qRT-PCR检测。

    3.结果

    保存24h后保存液1-11   ORF1ab基因的扩增曲线与CT值29.668 ;29.207 ;26.496 ;24.534;23.863;24.395;34.504;33.191;32.559;32.316;34.816

    保存24h后保存液 1-11 N基因的扩增曲线与CT值27.832;25.488;24.684;24.707;24.293;24.637;34.934;33.848;33.543;30.785;35.090

    保存72h后保存液1-11   ORF1ab基因的扩增曲线与CT值30.887;30.730;29.973;24.887;25.918;27.855;33.777;31.918;31.598;31.402;33.988


    保存72h后保存液 1-11 N基因的扩增曲线与CT值 31.660;30.746;28.582;25.699;26.855;28.613;34.137;32.910 ;32.309;31.879;36.434

    保存120h后保存液1-11   ORF1ab基因的扩增曲线与CT值

    32.746;32.230;31.918; 30.074;30.246;26.316;33.902;33.293;33.176;31.918 ;35.887


    保存120h后保存液 1-11 N基因的扩增曲线与CT值33.402;33.066;31.434;31.145; 29.520;25.559;33.777;33.965;33.809;33.988;35.871

    4.结论

    使用本核酸酶抑制剂复合物的保存液在低至0.1M异硫氰酸胍时比传统配方的3M异硫氰酸胍的效果还要好,如果用150g/L复合物与0.5M异硫氰酸胍就显著优于传统配方。

    三、灭活病毒效果测试

    用HSV-1与EV71病毒来测试保存液对病毒的灭活效果,测试显示使用低至0.5M异胍与150g/L的核酸酶抑制剂复合物能够有效灭活病毒。

    用于减少灭活款病毒保存液中异硫氰酸胍的用量,增强保存效果、显著降低成本。
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